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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 兩周 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
熒光定量PCR試劑盒（Real-time PCR試劑盒） 是2×濃縮的實時定量PCR擴增的預混合溶液。該預混液中含有熱啟動Taq酶，SYBR Green I，dNTP，Mg2+ , Enhancer , 特殊穩定劑、優化的反應緩沖液，具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。
熒光定量PCR試劑盒使用時，僅需在擴增體系中加入模板和引物即可進行實驗，大大簡化操作過程，縮短操作時間，降低污染概率。
本品采用全新的化學修飾的熱啟動聚合酶，常溫下完全封閉聚合酶的活性，可有效抑制非特異性產物擴增，從而顯著提高PCR反應的擴增效率，使定量PCR可以在寬廣的定量區域內獲得良好的線性關系。
| 產品名稱 | 規格 | 價格 |
| ReliaTM SYBR QPCR Mix | 1ml | 詢價 |
| 5ml | ||
產品優勢：
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特異性強：能對低拷貝基因或多樣性模板的定量，具有高特異性和靈敏度；
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靈敏度高：采用熱啟動酶的激活機制，可以在室溫條件操作，減少非特異性擴增；
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擴增效率高：熒光定量擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
產品應用：
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基于熒光定量PCR檢測；
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核酸擴增和基因表達；
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自動化和高通量的定量基因分型研究；
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基因組學相關應用。
注意事項：
1.由于本品檢測靈敏度*，即使空氣中微量的DNA氣溶膠都可以引起污染，進而導致實驗失敗。因此反應體系配制時請于超凈工作臺內進行，配制過程中請使用干凈滅菌槍頭、反應管，條件容許的實驗室推薦使用專用的移液槍，避免交叉污染。
2.由于本品中含有熒光染料SYBRGreen I，因此無論保存還是配置反應體系時都應該盡量避免強光照射。
3.本產品中不含用以校正孔與孔之間產生的熒光信號誤差的Rox ReferenceDye，客戶可根據qPCR儀器技術指導決定是否需要加ROX內參染料，用于消除信號本底以及校正孔與孔之間產生的熒光信號誤差。
4.建議在冰上配制PCR反應液，再放入PCR儀器中擴增?？梢蕴岣邤U增特異性，減少背景。
5.模板DNA：用本產品，cDNA、基因組DNA、質粒DNA、病毒DNA等都可作為模板。在添加DNA模板時請注意模板量對PCR擴增的影響。本產品建議添加量為：cDNA添加量不應超過總反應體系的10%；基因組DNA為模板時，為避免在高濃度區域出現線性差的情況，請注意添加量小于500ng；病毒DNA也可作為PCR模板，添加時請以300ng為上限；由于質粒DNA濃度和拷貝數很高，在添加PCR模板之前最好進行稀釋梯度試驗，以便確定合適的質粒DNA拷貝數。
QPCR反應體系配制
| 試劑 | 體積 | 終濃度 |
| ReliaTMSYBR qPCR mix | 25 μl | 1× |
| Forward Primer 10uM | 1 μl | 0.2 uM |
| Reverse Primer 10uM | 1 μl | 0.2 uM |
| 模板DNA | x μl | x |
| 無菌超純水 | Up to 50 μl | |
PCR擴增反應條件
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 過程 |
| 預變性 | 95℃ | 15min | 預變性 |
| 變性 | 95℃ | 10 s | 循環反應（40 cycles） |
| 退火 | 55~60℃ | 20 s | |
| 延伸 | 72℃ | 20 s | |
| 變性 | 95℃ | 15 s | 熔解曲線 |
| 退火 | 60℃ | 60 s | |
| 延伸 | 95℃ | 15 s |
結果與分析：
PCR擴增結束后，加做熔解曲線，以區分擴增產物及引物二聚體。根據擴增曲線和熔解解曲線結果可進行PCR定量標準曲線的制作。
張先生